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基因工程的制备过程-基因工程制药的方法

接下来为大家讲解基因工程的制备过程，以及基因工程制药的方法涉及的相关信息，愿对你有所帮助。

简述信息一览：

基因工程的核心是将目的基因用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA.上，形成重组DNA。根据目的基因片段末端的性质，以及质粒载体与外源DNA上限制酶切位点的性质，可***用黏端连接法或平端连接法。

【答案解析】试题分析：基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心。考点：考查基因工程的操作步骤。点评：难度中等，熟记基因工程的操作步骤。

（图片来源网络，侵删）

【答案】：基因工程又可称为DNA重组、分子克隆、基因操作等，是按照工程设计的方法，根据预先没计的蓝图，***用分子生物学、核酸生物化学以及微生物遗传学的现代方法和手段。实现DNA的人工重组。这种DNA重组主要是指创造自然界中没有的DNA分子的新组合。

基因工程技术包括四步：提取目的基因；目的基因与动载体结合；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与表达。

目的基因制备和分离：一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。2）DNA重组载体的构建：选择植物表达载体，根据载体选择或添加酶切位点，然后进行酶切连接，构建重组载体。

（图片来源网络，侵删）

基因克隆：首先，必须确定并提取所需转基因的基因，例如BT蛋白基因或抗草甘膦基因，这些通常来源于细菌。利用现代分子生物学技术，如聚合酶链反应（PCR），可以精确地从生物体的基因组中***目标基因片段。

载体构建：接下来，将目的基因通过特定的酶连接到质粒分子上，形成一个含有目的基因的新质粒分子。转化：在这一步骤中，通常使用农杆菌作为载体将基因转移到植物细胞中。农杆菌能够侵染植物细胞，并促进细胞分裂，形成小疙瘩，即“冠瘿”。

然后，利用最常用的PCR手段，就能将我们所需的基因片段，从原来的生物基因组中克隆出来。载体构建把这一段目的基因，通过酶连接到一个特定质粒分子上，构成一个插入目的片段的新的质粒分子。转化这一步需要用到农杆菌。农杆菌是一类土壤细菌。

具体来说，转基因***的制备需要经过以下步骤：选择目标基因：科学家根据需要，从微生物、动物或植物等来源中选择具有特定功能的基因，如抗虫、抗病基因等。构建基因载体：将选择好的目标基因插入到一种可以转移到植物细胞中的载体上，形成重组DNA分子。

一：过程：首先获得需要待转生物个体的基因片段，有时会经过加工修饰，放入特殊的载体（这些载体通常都是一些病毒改造的），然后注射到表达的个体中，病毒载体就会将这个基因片段随机插入到被注射个体的基因组中，引起被注射生物体的性状可遗传的改变（能够正常遗传的几率是很低的）。

基因打靶基因打靶是将基因从“基因枪”里直接打入靶细胞。用特殊物质将目的基因包裹起来，然后像***一样，直接打入靶细胞。好处：操作方便坏处：基因进入方式太暴力，且对目的细胞的细胞膜有机械损伤，成功率低，在万分之一一下。 2）显微注射这是目前较为成熟，应用也最广的一种了。

通过将构建好的表达框与表达载体相连接，表达载体上具有受体的同源臂，可以通过同源重组的方式概率地将需要表达的表达框整合到特定的位点上。和基因枪，crisper-cas9，转原生质体不同的是，我们通过农杆菌介导的方式转化，结果只有两个：1，整合到了我们想要表达的正确位点上；2，根本就没有发生整合。

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