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基因工程环化问题-基因工程自身环化

简述信息一览:

高中生物,基因工程,帮忙解答一下这一题

1、CaCl2是氯化钙它可以使大肠杆菌转化为感受态细胞使得携带Q基因的重组质粒容易导入细胞内。标记基因就是用于检测重组质粒是否导入细胞的基因。

2、它所识别的DNA序列是指切口处,而不是整个基因,基因怎么可能那么短呢,识别到这样的切口序列后在特定的位点切下去,露出粘性末端,然后有相同粘性末端的基因片段就可以接上了。

基因工程环化问题-基因工程自身环化
(图片来源网络,侵删)

3、真核细胞、原核细胞不是具体用来干嘛的,只是对细胞的一个分类。像病毒就不具有细胞结构,是不属于这两个分类中的。基因存在于DNA中,而DNA存在于细胞中,当然是可以用来提取目的基因的。一般目的基因的获取方法有:从基因文库中提取目的基因,使用PCR扩增技术获得目的基因,人工合成。

高中生物,基因工程,回答一下下面的问题?

1、而X-4是在E2的切口处插入了Tcr基因,没有用到E2,所以E2处不会断裂,不符合题意,所以X-4不增加。

2、如果用两种相同的酶切割,所得产物就复杂了,不仅仅有以上产物,还有质粒自身的环化,目的基因自身的环化,且不可控制插入目的基因在质粒中的方向。

基因工程环化问题-基因工程自身环化
(图片来源网络,侵删)

3、质粒不都可以作为运载体,作为载体要有几个标准,主要的要有酶切位点,有标记基因(方便检测),可以稳定的再受体细胞存在并***。2 重组的质粒的形成在细胞外,然后在导入受体细胞。

基因工程里,用两种不同的限制酶切割一起切割质粒和含目的基因的DNA,为什...

取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切,同样的,载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。

降低了环化可能。如果切割位点为A-B-B之流,那仍旧可能自发环化。但位点由我们选择,可以规避以上情况。

用两种酶是为了得到链状的目的基因,一般是不用一种酶的,比如一种限制性内切酶可以得到 ---TA 的末端,因为DNA是双链,那么目的DNA的两端就可以形成互补(这里由于版面的关系我就不表示出来了,你自己简单的画个示意图就明白),产生一个环状的DNA分子,就很难用于研究了。

为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接。限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链***定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

两种限制性内切酶切割,切割后形成的黏性末端不同,避免了由于相同的黏性末端碱基互补配对而出现质粒与质粒、目的基因与目的基因连接。因为用DNA连接酶连接时,除了缝合磷酸二酯键外,还要依靠相互间的碱基互补配对。

一般会使用相同的两个限制性核酸内切酶对目的基因和载体进行切割,使它们产生相同的末端,可以在T4 dna 连接酶的作用下,进行连接反应,构建重组质粒。一般在构建重组质粒的时候都会先用大肠杆菌做克隆,因为大肠杆菌的步骤简单,培养方便,提取质粒方便。

关于基因工程环化问题,以及基因工程自身环化的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。