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蛋白质原位分析技术-蛋白质定位

编辑小哥M
蛋白质
2024-06-24 21:48:35
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简述信息一览：

1、关于m区带与ig类型关系的叙述错误的是
2、急切求解WB,IHC的意思!
3、什么是细胞化学法,在细胞内脂类的显示中有什么
4、请问有谁知道核酸引物和探针PAGE纯化的步骤???
5、什么是荧光原位杂交?有什么用?
6、如何利用一维氢谱测定蛋白质与配体的相互作用

关于m区带与ig类型关系的叙述错误的是

M区带的电泳位置可大致反应出免疫球蛋白的类型，IgG型多位于α区至γ慢区，IgA型多位于γ1与β区，IgM型多位于β2或γ区，IgD型多位于β或γ区，IgE多分布于β区至慢γ区。

因骨破坏和骨质吸收，大量钙入血，加之M蛋白与钙结合使结合钙增加，可致高钙血症和尿钙增多。

（图片来源网络，侵删）

【答案】：B 重链病是由于浆细胞发生突变和异常增殖，只能产生Ig的重链或有缺陷的重链，致使血清和尿中出现大量的游离的无免疫功能的Ig重链所致的疾病。

急切求解WB,IHC的意思!

1、DAB有致癌的潜在可能，操作时要小心仔细。（二）IHC免疫组织化学 IHC免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。

2、WB：whole blood 全血（即未经任何方式分部分离的血液）Western Blot，“Western免疫印迹法”。是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

（图片来源网络，侵删）

3、RT-PCR我想你应该说的是Real time PCR或者Q-PCR吧，它主要是在转录水平研究目的基因表达的情况，一定程度上可以反映蛋白最终的表达量。WB和ELISA还有IHC（免疫组化）是目前国际上研究蛋白的主要手段和方法，他们三个分别用于蛋白的定性，定量和定位。

什么是细胞化学法,在细胞内脂类的显示中有什么

它本声不具备细胞毒活性，而是通过在提内的代谢转化，经肝微粒体混合功能氧化酶活化才有烷基化活性。3）许多药物由于味觉不良而限制其应用。如苦味是一化合物溶于口腔唾液中，与味觉感受器苦味受体产生相互作用之故。

它本声不具备细胞毒活性，而是通过在提内的代谢转化，经肝微粒体混合功能氧化酶活化才有烷基化活性。 3）许多药物由于味觉不良而限制其应用。如苦味是一化合物溶于口腔唾液中，与味觉感受器苦味受体产生相互作用之故。

酒的主要化学成份是酒精，化学名叫乙醇。乙醇进入人体，能产生多方面的破坏作用：血液中的乙醇浓度达到0.05%时，酒精的作用开始显露，出现兴奋和欣***；当血中乙醇浓度达到0.1%时，人就会失去自制能力。

溶剂按化学组成分为有机溶剂和无机溶剂。是一大类在生活和生产中广泛应用的有机化合物，分子量不大，常温下呈液态。有机溶剂包括多类物质，如链烷烃、烯烃、醇、醛、胺、酯、醚、酮、芳香烃、氢化烃、萜烯烃、卤代烃、杂环化物、含氮化合物及含硫化合物等等，多数对人体有一定毒性。

山梨酸及其钾盐：对霉菌、酵母和需氧菌均有抑制作作用，几乎没有毒性。双乙酸钠：是霉菌和细菌的高效抑制剂，它通过渗透于微生物的细胞壁，干扰细胞内各种酶体系而产生作用。对羟基苯甲酸酯类：对细菌、酵母、霉菌都有抗菌作用，防腐持续性强，化学性质稳定，毒性低。

高分子纳米生物材料从亚微观结构上来看，有高分子纳米微粒、纳米微囊、纳米胶束、纳米纤维、纳米孔结构生物材料等等。下面主要就高分子纳米微粒及其应用做一简单介绍。高分子纳米微粒或称高分子纳米微球，粒径尺度在1～1000nm范围，可通过微乳液聚合等多种方法得到。

请问有谁知道核酸引物和探针PAGE纯化的步骤???

探针的获得常***用随机引物延伸法的PCR合成和扩增，可获大量的DNA探针，或利用带有噬菌体强启动子多克隆位点的质粒载体来合成RMA探针，也可利用质粒菌扩增质粒，经酶切后纯化的基因片断，均可以获得制备探针原料。

PCR的技术的主要步骤：DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。

单链DNA探针的合成方法主要有下列两种：（1）以M13载体衍生序列为模板，用Klenow片段合成单链探针；（2）以RNA为模板，用反转录酶合成单链cDNA探针。

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然***过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

由于PCR扩增过程中效率不均一和反应平台问题，基于PCR产物量进行分析所得数据的可靠性将下降，而RPA没有扩增过程，因此，分析的数据真实性较高。由于与反义RNA探针杂交的样品RNA仅为该RNA分子的部分片段，因此，部分降解的RNA样品仍可进行分析。步骤较少，耗时短。

引物3’端配对DNA聚合酶是在引物3’端添加单核苷酸，所以，引物3’端5～6个碱基与靶DNA的配对要求必须精确和严格，这样才能保证PCR有效扩增。引物设计是否合理可用PCRDESN软件和美国PRIMER软件进行计算机检索来核定。人工合成的寡核苷酸引于最好经过色谱（层析）纯化或PAGE纯化，以除去未能合成至全长的短链等杂质。

什么是荧光原位杂交?有什么用?

荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization， FISH）是一种分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。

荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。

荧光原位杂交（是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。

vers top是荧光原位杂交技术的意思；利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。

英文参考 fluorescent in situ hybridazation，FISH 荧光原位杂交技术（fluorescent in situ hybridazation，FISH）是根据已知微生物不同分类级别上种群特异的DNA序列，以利用荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为探针，与环境基因组中DNA分子杂交，检测该特异微生物种群的存在与丰度。