基因工程的转化-基因工程的转化率不是100%的原因
文章阐述了关于基因工程的转化，以及基因工程的转化率不是100%的原因的信息，欢迎批评指正。
简述信息一览：
基因工程为什么要算转化效率和频率
1、为什么选大肠杆菌进行基因工程的实验 比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率，并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明：高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率，其效率提高了961%，而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。
2、但是与双子叶植物相比，农杆菌侵染单子叶植物能力较差，转化率低，转化的外源基因表达水平低。因此人们还在不断改进Vir区的基因表达，感受态细胞选择等方面改进农杆菌介导法。我们实验室一直在进行的百合转基因至今没有成功。所以说并不是说农杆菌介导法无法转化单子叶植物。
3、转基因技术是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术称之为转基因技术（Transgenic technology）。人们常说的遗传工程、基因工程、遗传转化均为转基因的同义词。
4、基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
5、从生物学的观点来看，生物机体对能量的利用和转化的效率是当今世界上任何机械装置所望尘莫及的。因此，通过转基因动物来生产药物是迄今为止人们所能想象得出的最为有效、最为先进的方法。
基因工程为何要用农杆菌转化法?求解
因为农杆菌容易侵入生物的细胞，便于将目的基因带入生物体细胞，以便在生物体细胞内表达完成工程目的。
先通过双酶切反应酶切空质粒载体和目的基因，再通过酶连反应连接空质粒载体和目的基因，从而构建成完整的重组质粒。此时重组质粒的T-DNA区包括T-DNA边界序列、***原点、突变启动子片段、GUS报告基因、抗性基因。我们称这段T-DNA区为目的片段。
将目的基因导入植物细胞***用最多的方法是农杆菌转化法。如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。此法比较经济和有效，迄今为止，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得的。
基因工程中导入目的基因时转化和转到各指什么,CaCl2又有什么用_百度知...
导入目的基因既是将带有目的基因的运载体导入受体细胞。这就需要CaCl2使受体细胞的细胞膜通透性增大，易于运载体的进入。
氯化钙，一种由氯元素和钙元素组成的化学物质，化学式为CaCl2。微苦。它是典型的离子型卤化物，室温下为白色、硬质碎块或颗粒。它常见应用包括制冷设备所用的盐水、道路融冰剂和干燥剂。因为它在空气中易吸收水分发生潮解[5]，所以无水氯化钙必须在容器中密封储藏。
被动转化：用含有目的基因的农杆菌侵染植物伤口，从而将目的基因插入植物基因组中，从而实现遗 传转化。
通过转化将载体DNA导入受体菌继而得到含有目的DNA插入的转化菌株是构建DNA文库最为关键的一步。化学法（化学药物如氯化钙等）转化 氯化钙法转化细胞 细菌处于0℃及CaCl2低渗溶液中时，菌细胞膨胀成球形。
⑵、植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法①、农杆菌：土壤微生物，易感染双子叶植物和裸子植物；对大多数单子叶植物没有感染力。②、Ti质粒的T_DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。③、过程：目的基因插入T_DNA，T_DNA进入农杆菌，将农杆菌导入植物细胞。
基因工程的过程是怎样操作的?
基因工程一般包括四个步骤：一是取得符合人们要求的DNA（）片段，这种DNA（）片段被称为“目的基因”；二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组 DNA；三是把重组DNA引入某种细胞；四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。
【答案】：重组DNA的主要步骤主要包括以下4个基本步骤：（1）目的基因的获得；（2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；（3）将人工重组的DNA分子导入能进行正常***的寄主细胞，从而得到***：（4）重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。[考点]重组DNA的过程。
基因工程是一次非常复杂的技术操作。它的环节之繁多、操作之细致是其他工程所无法比拟的。但是如果跳开细节问题，基因工程操作流程还是比较明了的。它的基本步骤大致可归纳如下：第一步：制备所需的基因 所谓目的基因就是人们依据工程设计中所需要的某些DNA分子的片段。
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