咪唑蛋白质-咪唑为什么能够洗脱蛋白
文章阐述了关于咪唑蛋白质，以及咪唑为什么能够洗脱蛋白的信息，欢迎批评指正。
简述信息一览：
- 1、纯化后的蛋白在含有高浓度nacl的情况下浓缩容易沉淀吗
- 2、甲巯咪唑的动力学
- 3、咪唑乙烟酸的作用方式是什么?特点是什么?
- 4、蛋白质纯化技术的方法有哪几种?
- 5、稳定蛋白质构象的作用力有哪些?
- 6、蛋白质等电点的测算方法?
纯化后的蛋白在含有高浓度nacl的情况下浓缩容易沉淀吗
1、理由相信，浓度越高，对保存蛋白质越有利。加入 PEG 和更换 缓冲液种类是一种值得试验的方法，但结果如何还在两可之间，没试过就不会知道。镍柱下来以后，溶液中混有相当多咪唑和议定含量的Ni，都有可能引起蛋白质不稳定变性沉淀。
2、此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子（如硫酸铵的SO4和NH4）有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。
3、会 简单地说氯化钠的在乙醇中是不溶解的，而水是和乙醇可以互溶的。这样低浓度的氯化钠中的水会被乙醇给夺走了，变成高浓度的了，蛋白质在高浓度的氯化钠作用下发生盐析，产生沉淀。
4、盐析法：盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
5、A.B.C都可以，起初是促进溶解，但是随着盐浓度的上升，上述三者都可以让蛋白析出为沉淀。
6、但有的蛋白质（如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白）在较高的温度（25度）比0度时溶解度低，更容易盐析。（2）pH值：大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低。（3）蛋白质浓度：蛋白质浓度高时，欲分离的蛋白质常常夹杂着其他蛋白质地一起沉淀出来（共沉现象）。
甲巯咪唑的动力学
本品口服后由胃肠道迅速吸收，吸收率约70～80%，广泛分布于全身各个细胞，但浓集于甲状腺，在血液中不和蛋白质结合，T1/2约3小时（也有报道为4～14小时），其生物学效应能持续相当长时间。甲巯咪唑及代谢物75～80%经尿排泄。易通过胎盘并能经乳汁分泌。
本品口服后由胃肠道迅速吸收，吸收率约70～80%，广泛分布于全身，集于甲状腺，在血液中不和蛋白质结合，T1/2约3小时，其生物学效应能持续相当长时间。甲巯咪唑及代谢物75～80%经尿排泄，易通过胎盘并能经乳汁分泌。
甲巯咪唑片的药代动力学特性显著。口服后，该药物在胃肠道的吸收效率高达70%～80%，其吸收过程迅速。药物分布广泛，尤其在甲状腺组织中浓度较高，显示出其对甲状腺的特异性亲和力。在血液中，甲巯咪唑并未与蛋白质形成牢固结合，T1/2（半衰期）大约为3小时，这意味着其生物活性可以持续较长的时间。
甲疏咪唑片在口服后能高效地被胃肠道吸收，吸收率大约在70%到80%之间。药物分布广泛，特别倾向于集中在甲状腺组织中。在血液中，甲疏咪唑并不与蛋白质结合，其半衰期（Tv2）大约为3小时，这意味着其生物效应能够持续较长一段时间。药物代谢产物的排泄情况大约为75%到80%，主要通过尿液排出体外。
咪唑乙烟酸的作用方式是什么?特点是什么?
1、咪唑乙烟酸属于长残效除草剂，施用后来年不宜种植敏感的作物，如：油菜、高粱、马铃薯等。
2、杀草谱广，比其它大豆田常用除草剂乙草胺、氯嘧磺隆、异恶草松、烯禾啶、氟磺胺草醚等的杀草谱广，有效防除豆田常见禾本科及阔叶杂草。持效期长，残效期可达18～20个月，对整个生长季节均有效，特别适宜在东北单季大豆地区使用。进口助剂，药剂吸收快，受天气影响小。
3、除草剂能杀死杂草或有害植物，而不影响农作物正常生长的化学药剂。，可用于防治农田杂草或杀灭非农耕地的杂草或灌木。按其作用特点可分为选择性除草剂和灭生性除草剂，选择性除草剂指在使用一定剂量和浓度的范围内，可有选择性地杀死某些种类的植物，而对其他种类植物无害。
4、根据作用方式分类：（1）选择性除草剂：除草剂对不同种类的苗木，抗性程度也不同，此药剂可以杀死杂草，而对苗木无害。如盖草能、氟乐灵、扑草净、西玛津、果尔等。（2）灭生性除草剂：除草剂对所有植物都有毒性，只要接触绿色部分，不分苗木和杂草，都会受害或被杀死。主要在播种前、播种后出苗前、苗圃主副道上使用。
蛋白质纯化技术的方法有哪几种?
离子交换色谱法（ion exchange chromatography，IEC）是根据物质的酸碱度、极性和分子大小的不同进行分离的技术，通常包括吸附、吸收、扩散、穿透、静电引力等复杂的物理化学过程。
盐析法：盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
【答案】：D 本题要点是蛋白质分离纯化的主要方法。蛋白质分离纯化的主要有盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛。
常见的蛋白分离纯化方法：盐析法、盐析法、离子交换层析法、亲和层析法、凝胶电泳法、高效液相色谱法。盐析法：利用不同蛋白质对盐浓度的敏感性差异，通过逐渐加入盐类使蛋白质沉淀析出，再通过离心去除沉淀物。
蛋白质的分离纯化方法如下：根据蛋白质溶解度不同的分离方法 蛋白质的盐析法：中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析。
稳定蛋白质构象的作用力有哪些?
疏水作用：是指蛋白质分子中疏水性氨基酸（如缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等）侧链避开水相而相互聚集的作用。主要存在于蛋白质分子的内部，对蛋白质构象的形成和稳定均起着重要的作用。（4）范德华力：一般指范德华引力，狭义的范德华力是指在非极性分子或非极性基团的瞬时偶极间的相互作用。
氢键是维持蛋白质二级结构结构如α-螺旋，β-折叠等构象的作用力。疏水键是多肽链上疏水性较强的氨基酸的非极性侧链避开水相粘附聚集在一起，形成的孔穴，对维持蛋白质的***结构起重要作用。
稳定蛋白质一级结构的主要作用力有肽键和二硫键。蛋白质的一级结构（primary structure）就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序，也是蛋白质最基本的结构。它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。各种氨基酸按遗传密码的顺序，通过肽键连接起来，成为多肽链，故肽键是蛋白质结构中的主键。
稳定蛋白质***结构的主要作用力是疏水作用。蛋白质***结构介绍。蛋白质的***结构是指球状蛋白质的多肽链在二级结构的基础上相互配置而形成特定的构象。
对于二级结构来说，作用力是氢键；对于***结构来说，为次级键，包括：二硫键、氢键、盐键、范德华力、疏水作用（主要）；四级结构则是一些非共价键，包括：氢键、盐键、范德华力、疏水作用。蛋白质分子结构分4个层次，即一级、二级、***、四级结构，后三者统称为空间构象。
一级结构主要是肽键，二硫键的位置也属于一级结构；二级结构是氢键；***结构是疏水键、盐键、氢键、范德华力；四级结构是疏水作用、氢键、离子键。
蛋白质等电点的测算方法?
1、解析：等电点是蛋白质的一个重要性质，测定等电点的方法是在不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率，然后用迁移率对pH作图，对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。
2、如果要测定准确的等电点，一般是不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率，然后用迁移率对pH作图，对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位，故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
3、找出所有可解离基团，并注明它们各自的pKa→假定它们在极低的pH下都处于非解离状态→逐步提高溶液的pH→可解离基团按照pKa从低到高的顺序依次释放出质子，即pKa越低的就越先释放出质子→写出所以可能的解离形式→找出净电荷为0的形式→将净电荷为0形式两侧的pKa相加除于2 。
4、等电点计算：pI=（pK1+pK2）/2（pK为基团的酸度系数）。基于蛋白质氨基酸序列中各个氨基酸的pKa值，通过计算预测蛋白质的等电点。在等电点时，蛋白质分子在电场中不向任何一极移动，而且分子与分子间因碰撞而引起聚沉的倾向增加，所以这时可以使蛋白质溶液的粘度、渗透压均减到最低，且溶液变混浊。
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