当前位置:首页 > 基因工程 > 正文

基因工程的黏性末端-基因工程黏性末端怎么读

今天给大家分享基因工程的黏性末端,其中也会对基因工程黏性末端怎么读的内容是什么进行解释。

简述信息一览:

基因工程技术操作常用同种限制酶处理目的基因和质粒,但有时会用不同...

对的。相同的酶识别位点一样粘性末端一样;不同的酶可能识别位点不同但是产生的粘性末端是一样的,所以同样可以使用。

单酶切:如果用同一种限制酶切割质粒和目的基因,会产生四个相同的黏性末端,那么可能会出现四个结果。(1)质粒和质粒连接(2)质粒和目的基因连接(3)目的基因和目的基因连接(4)质粒和目的基因环化。因此为了防止出现上面的情况,会***用双酶切。

基因工程的黏性末端-基因工程黏性末端怎么读
(图片来源网络,侵删)

如果目的基因的两端都有限制酶1的切点,你可以只用一种限制酶1切割,这样目的基因两侧的末端相同,会出现目的基因环化(首尾连接),这不利于目的基因和运载体质粒结合。

请问:基因工程中用两种限制性内切酶切割如何避免出现质粒与质粒、目的基...

1、两种限制性内切酶切割,切割后形成的黏性末端不同,避免了由于相同的黏性末端碱基互补配对而出现质粒与质粒、目的基因与目的基因连接。因为用DNA连接酶连接时,除了缝合磷酸二酯键外,还要依靠相互间的碱基互补配对。

2、但用两种限制性内切酶切割最主要的目的是防止载体切割后的自连,几率不但大,而且可以产生克隆,大量的自连会影响挑选重组的克隆。

基因工程的黏性末端-基因工程黏性末端怎么读
(图片来源网络,侵删)

3、取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切,同样的,载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。

4、降低了环化可能。如果切割位点为A-B-B之流,那仍旧可能自发环化。但位点由我们选择,可以规避以上情况。

5、目的基因的切割:①选取的限制酶,其识别序列不可出现在目的基因内部,否则会破坏目的基因。②为了避免目的基因自身环化(目的基因的两端被连接成环),一般切割目的基因时选取目的基因两侧产生不同末端的限制酶。质粒的切割 ①选取限制酶,要和切割目的基因的保持一致。

基因工程里面,将粘性末端用碱性磷酸酶处理后,5~的磷酸基团变成什么样...

磷酸集团被切除,变成羟基;效果就是没办法自连,此时与正常的DNA片段连接就可以避免自连带来的干扰。

碱性磷酸酶,如同一个拆解工,能剥去DNA分子5端的磷酸基团,使之从5-P末端转换为5-OH末端,这一过程称为去磷酸化。在质粒构建中,当需要避免载体自连的风险时,去磷酸化就显得尤为重要,特别是单酶切或同尾酶切产生的平末端情况下,碱性磷酸酶让DNA片段的5-OH得以与载体相连,而非与自身。

该酶催化契合的双链DNA或RNA的5-磷酸末端和3-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。

...还是可以用不同的限制酶,只要得到的黏性末端相同就行了?

1、可以不同,有些限制酶的酶切位点是相同的,只要他们切出来的黏性末端或平末端是相同的就行。

2、这句话肯定对。不同的限制酶识别的碱基序列不同,而且都有特定的切割位点。有时不同的限制酶确定能切出相同的黏性末端。你看下面这两个序列:—GGATCC——CCTAGG—切割点在GG之间;—GATC——CATG—切割点在G的前面。

3、不行,同一种限制酶只专一识别一种粘性末端序列,如果可以切出不同的话,那基因工程中重组质粒就不可行了。因为那样整个质粒上就会存在空缺点,(目的基因只有一个)。

4、不正确,既然你是要高考的人了,那你就看一下2005年天津的高考理综生物题,最后有一道大题(应该是第31题)是两个黏性末端,那肯定不是一种限酶切出来的,因为它们的序列不一样。答案中有一句话:因为由两种限制性内切酶切割后所形成的黏性末端是相同的(或“是可以互补的”) 。

5、其实用同一种限制酶,也就是单酶切,去分别切割目的基因与运载体这种方法是最简单。如果用传统酶切连接法,只要片段两端黏性末端相同就没问题,所以可以用同一种酶,分别用同两种酶,也可以用黏性末端相同的不同酶或者切平末端。

平末端是什么

1、基因工程之中,用限制性核酸内切酶切割DNA分子时候,会产生两种末端。一种是平末端,一种是粘性末端。

2、用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端 根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。

3、再用T4DNA连接酶连接,但平末端连接要比粘性末端连接的效率低得多。在分子生物学的研究中,DNA末端的连接是一极为常用的基本操作,可分为粘末端和平末端连接,粘末端连接效率相对较高,平末端的连接效率一般非常低, 但平末端连接具有普适性,被广泛地用于将外源DNA片段的相互连接当中。

基因工程考研题目:试述将一个平末端DNA片段克隆到载体上EcoRI和Xhol...

平末端连接和粘性末端连接。第一种就是***用粘性末端连接的策略。通过在你的平末端目的片段两端分别加上含EcoRI和Xhol的酶切位点的接头序列,然后用这两种内切酶分别对目的片段和载体做双酶切,然后回收酶切后的载体和目的片段并连接。第二种就是***用平末端连接的策略。

第一种就是***用粘性末端连接的策略。通过在你的平末端目的片段两端分别加上含EcoRI和Xhol的酶切位点的接头序列,然后用这两种内切酶分别对目的片段和载体做双酶切,然后回收酶切后的载体和目的片段并连接。第二种就是***用平末端连接的策略。

答案的两个要点其实就是我们做载体构建两个基本侧略。平末端连接和粘性末端连接。第一种就是***用粘性末端连接的策略。通过在你的平末端目的片段两端分别加上含EcoRI和Xhol的酶切位点的接头序列,然后用这两种内切酶分别对目的片段和载体做双酶切,然后回收酶切后的载体和目的片段并连接。

关于基因工程的黏性末端,以及基因工程黏性末端怎么读的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。