蛋白质鉴定ab液-蛋白质鉴定实验步骤和原理

文章阐述了关于蛋白质鉴定ab液，以及蛋白质鉴定实验步骤和原理的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

• 1、如何鉴定蛋白质简写出原理过程该过程双缩脲试剂应如何使用?
• 2、高中生物为什么蛋白质的检测要先注入双缩脲试剂A液,再注入双缩脲试剂B...
• 3、双缩脲试剂a液和b液分别是什么?
• 4、蛋白质检验实验步骤
• 5、蛋白质鉴定时,把ab液混合在再加入蛋白质样液中为什么导致实验失败_百度...

如何鉴定蛋白质简写出原理过程该过程双缩脲试剂应如何使用?

1、在一定浓度范围内，反应后颜色与被测样品蛋白质含量呈线性关系，即蛋白质浓度越高，体系的颜色越深。反应产物在540nm处有最大吸收峰（吸光度）。

2、操作方法，标准曲线的制作：于试管中分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，0ml的1%标准酪蛋白溶液，用水补足1ml。然后各加入4ml双缩脲试剂，充分摇匀在室温下反应30min，于540nm波长下测定光吸收率。以酪蛋白的含量为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。

3、蛋 白质的鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01 g／mL的硫酸铜溶液。

4、双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。 具体方法是： 先将双缩脲试剂A加入组织样液，摇荡均匀（必须营造碱性环境），再加入双缩脲试剂B，摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

高中生物为什么蛋白质的检测要先注入双缩脲试剂A液,再注入双缩脲试剂B...

B液4滴是少量的。如果先加B在加A，没有等到营造完碱性环境，就直接生成的氢氧化铜沉淀了。

双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液； 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。

因为在使用双缩脲试剂时候是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境。CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu（OH）2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

首先，双缩脲试剂的成分不是氢氧化铜，其检验蛋白质的原理是先加入氢氧化钠形成碱性环境，在这种碱性环境下蛋白质会和铜离子反应，形成紫色反应。因此先加A液（氢氧化钠溶液），再加B液（硫酸铜溶液）。

A是氢氧化钠，这是为了营造碱性的反应环境。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。

双缩脲试剂a液和b液分别是什么?

物质不同双缩脲试剂A液是NaOH的水溶液。双缩脲试剂B液是CuSO4的水溶液。二者区别：浓度不同双缩脲试剂A液的质量分数为0.1 g/mL。双缩脲试剂B液的质量分数为0.01 g/mL。作用不同加入双缩脲试剂A液为了营造碱性环境，加入量一般为3毫升。

双缩脲试剂由A液是质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液，B液是质量浓度为0.01g/mL硫酸铜溶液。加入双缩脲试剂A液为了营造碱性环境，加入量一般为3毫升。双缩脲试剂B液是为了使蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。加入量较少，只有几滴。

B液：0.01g/mL的 溶液.分别配制好A液和B液即可.原理：在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（）能与 反应，形成紫色络合物.由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键（—CO—NH—），因此，蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色.具体的可以去药智网查询，回答满意请您***纳，谢谢。

斐林试剂和双缩脲试剂在物质组成、使用方法、反应条件上存在以下不同：物质组成：斐林试剂由甲液（质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液）和乙液（质量浓度为0.05g/mL硫酸铜溶液）组成，而双缩脲试剂由A液（质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液）和B液（质量浓度为0.01g/mL硫酸铜溶液）组成。

B液是0.01g每ml的CuSO溶液 斐林试剂是检测还原糖的，需要将甲液和乙液按相同比例混合，摇匀，不让沉淀沉在试管底部，然后加入到还原糖中，水浴加热5-6min就会出现砖红色沉淀。

蛋白质检验实验步骤

1、蛋白质的盐析取5mL蛋白质溶液，加入等体积饱和硫酸铵溶液（浓度为50%饱和），微微摇动试管，使溶液混合均匀后，静置数分钟，球蛋白即析出呈絮状沉淀（如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵），用滤纸滤取上清液，滤液中再加入固体硫酸铵粉末至不再溶解，析出的即为清蛋白，再加水稀释，观察沉淀是否溶解。

2、试剂准备：考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解，通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时，需要准备标准蛋白溶液，用于制作标准曲线。样本处理：将待测样本与缓冲液混合，然后用组织匀浆器匀浆，保证样本均匀。反应：将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合，放入沸水浴中加热10分钟，使染料与蛋白质充分结合。

3、小麦中蛋白质成分检测具体步骤如下： 准备相关试剂。双缩脲试剂需要500ml的容量瓶，依次加入40g/L的CuSO4 30ml，25g/L的酒石酸钾钠100ml，再缓慢加入5mol/L的KOH 30ml，最后用去离子水定容。使用时要将此溶液与等体积透明的异丙醇混合。 取小麦样品。 将小麦样品制备成溶液。

蛋白质鉴定时,把ab液混合在再加入蛋白质样液中为什么导致实验失败_百度...

ab液先混合是检测还原性糖的。两者一混合就产生Cu（OH）2沉淀，怎么检测蛋白质。

双缩脲试剂和斐林试剂的机理不同，双缩脲试剂是在碱性环境下铜离子和蛋白质中的肽键形成紫色络合物。如果先进行混合，铜离子大多数会变为氢氧化铜，无法参与络合反应，还有（3）步骤中的双缩脲试剂B应该是滴4滴而不是2mL。

你看看反应步骤 试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）B液4滴是少量的。如果先加B在加A，没有等到营造完碱性环境，就直接生成的氢氧化铜沉淀了。

这个实验现象非常明显，当前后加入双缩脲A液1ml、B液四滴后，稍稍震荡即可呈现紫色，但是如果加入A液2ml，B液1ml，现象会更加明显，颜色会深紫色，因为蛋清稀释溶液浓度仍然比较大，同理大豆组织样液也一样。

原因如下：考马斯亮蓝法测定样品中的蛋白质含量，仪器是752N型紫外可见分光光度计，***用牛血清白蛋白（sigma）做标准曲线，问题就出在标准曲线上，考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度是生物化学中的经典实验，是利用蛋白质和染料结合的原理。

选择高蛋白的食物浆液，比如豆浆和蛋清。然后准备检测蛋白质的双缩脲试剂，由A液和B液组成，A液：氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液。B液：硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

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