基因工程工具手工制作-基因工程工具手工制作方法
简述信息一览：
基因工程与PCR技术的异同点
PCR技术的缺点是技术含量高，循环过程复杂，需要一定的器材。基因工程的优点是打破了常规育种难以突破的物种之问的界限，可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间，甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。人的基因可以转移到大肠杆菌中表达，细菌的基因可以转移到植物中表达。
【不同点】： PCR是DNA***的体外扩增技术 体内DNA***半不连续***，体外PCR连续***，不产生冈崎片段。
不同点：连续性不同 体内DNA***半不连续***，体外PCR连续***，不会产生冈崎片断。酶不同 PCR技术形成DNA时用耐热DNA聚合酶，而DNA***用的是生物体自身的DNA聚合酶，普通的DNA聚合酶是不耐热的。温度不同：体内DNA***温度是37度，体外PCR有变性、退火、延伸三种温度。
PCR技术扩增目的基因原理：DNA双链***过程：①加热至90～95℃DNA解链；②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成第二步：基因表达载体的构建目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
PCR（Polymerase Chain Reaction）和DNA***是两种不同的生物技术。DNA***是细胞内DNA的自我***过程，是细胞生长和繁殖的基础。DNA***在生物细胞的生理代谢过程中，是一种自动的过程，具有高度的正确性。PCR是一种实验室技术，是模拟DNA***的过程，是一种人工扩增DNA片段的方法。
基因工程操作的各种工具酶都是什么?
基因工程中主要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。限制性核酸内切酶用来切割运载体和目的基因两端 DNA连接酶则是将目的基因与运载体的黏性末端连接在一起。
基因工程涉及众多的工具酶可粗略的分为限制酶，连接酶，聚合酶，核酸酶和修饰酶五大类。其中，以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用最为突出。
工具酶主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。不同点参考下图 相同点 具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性，在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等。工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。
然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。工具酶：基因工程涉及众多的工具酶可粗略的分为限制酶，连接酶，聚合酶，核酸酶和修饰酶五大类。其中，以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用最为突出。
问题一：酶在基因工程如何运用 基因工程中目的基因的扩增需要用到DNA聚合酶；将目的基因与质粒相连需要用到限制性内切酶等。
基因工程的基本工具：“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链***定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
基因工程常用的载体?
质粒。质粒是小型环状DNA，因为可以自我***、具有标记基因、有限制酶切割位点、对受体细胞无害。是基因工程中常用的载体。
基因工程载体：在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我***的DNA分子。三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒，最常用的是质粒。
常见于细菌细胞内，也可通过人工方法导入其他生物体内。噬菌体：噬菌体是一种侵袭细菌的病毒，有高效表达和克隆扩增外源基因的能力。病毒载体：病毒载体是一种将外源基因导入细胞的病毒，有感染性强、表达效率高等优点。常用的病毒载体包括腺病毒、逆转录病毒和腺相关病毒等。
【答案解析】试题分析：质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌和酵母菌等生物细胞中，是细胞染色体外能够自主***的很小的环状DNA分子。
为什么说基因工程是一门精细操作的酶学工程?
催化DNA各种特异性反应的酶是分子生物学家进行DNA操作的基本工具，在分子克隆过程中，制备好目的DNA后，下一步就是使用限制性核算内切酶将待克隆的DNA片段切割下来，与特异性切割的载体在DNA 连接酶的作用下连接形成重组分子。
基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于本世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。
根据这个概念，人们可以从一个生物的基因中提取有用的基因片断，植入到另外一个生物体内，从而使该生物获得某些新的遗传性状。
基因工程是现代生物技术的核心，它是20世纪70年代发展起来的一门边缘学科，它的诞生源于现代生物学理论上的发展和技术上的发明。有人称基因工程是人类创造的操纵生命最有效、最准确的生物工具。这是建立在分子生物学理论基础之上的一种大胆设想。如果这种没想变成了现实，那么它对人类的贡献是不可估量的。
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