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基因工程中检测目的基因-基因工程中检测目的基因是否导入的具体步骤

简述信息一览:

有关基因工程中目的基因的检测的问题。

第一个问题:生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。

检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因(目的基因)是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。

基因工程中检测目的基因-基因工程中检测目的基因是否导入的具体步骤
(图片来源网络,侵删)

基因组文库中获取的目的基因是这种生物的所有基因,包含启动子,终止子以及内含子。cDNA文库获取的目的基因是mRNA反转录来的,是这种生物的部分基因,不含启动子,终止子以及内含子。

在构建载体,选择宿主细胞、设计分子克隆方案时都必须仔细考虑筛选的问题。以下就常用技术的基本原理加以介绍。根据重组载体的标志作筛选 最常见的载体携带的标志是抗药性标志,如抗氨芐青霉素(anpr)、抗四环素(terr)、抗卡那霉素(kanr)等。

基因工程中,目的基因的为什么要先检测后鉴定?检测和鉴定分别是指什么...

1、获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。在导人目的基因前,首先要获得目的基因即本题中的编码毒素蛋白的DNA序列,然后要将目的基因与运载体结合即与细菌质粒重组。

基因工程中检测目的基因-基因工程中检测目的基因是否导入的具体步骤
(图片来源网络,侵删)

2、利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选。此法不是直接筛选目的基因,而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞,因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。

3、标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况。因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达。一般标记基因的DNA序列是已知的,若选用抗氨苄青霉素基因,则可在目的基因导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞,若无异常,则抗氨苄青霉素已合成,说明基因已得到表达。

4、一般情况下我们有不止一个的样品,大量的样品。先检测第一部的目的是简单的筛选出有目的基因的样本。这是检测插入基因的目的。其次第二部是检测mRNA,有两个目的,第一是检测mRNA是否被翻译,因为某些情况下,插入的外援基因会被抑制。

5、有可能生物体内本身能少量表达这种蛋白质,那即使检测到mRNA或目的蛋白,也不代表基因重组成功了。如果不检测mRNA,而直接测目的基因和蛋白质,则不能确定蛋白质是由细胞本身基因所表达的还是外源的蛋白质。如果不检测蛋白质,即使目的基因在染色体上,并且能转录出mRNA,也不能保证此mRNA能正确翻译。

6、如果是对目的基因的检测和鉴定,那么基因工程的第四步目的基因的检测和鉴定为什么没有用到标记基因?目的基因的检测和鉴定是在确定目的基因已经导入受体细胞后,而不知道基因是否可以稳定维持和表达其遗传特性而进行的操作。

基因工程中目的基因的检测问题.

第一个问题:生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。

检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因(目的基因)是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。

利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选。此法不是直接筛选目的基因,而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞,因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。

关于基因工程中检测目的基因,以及基因工程中检测目的基因是否导入的具体步骤的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。