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基因工程操作实验-基因工程实验的操作程序及注意事项

今天给大家分享基因工程操作实验，其中也会对基因工程实验的操作程序及注意事项的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

胶回收应该换全新的电泳液去做凝胶电泳；小槽子要用80V的电压去跑；制胶要在0.7%的浓度；要视自己样的体积来选取梳子，因为小孔要尽量加样加满，充分利用胶。切胶尽量切小，但不能切掉条带，提高回收效率，就切四刀，干净利落；切胶后要用干净滤纸吸去水分；可用枪头捣碎胶块，加速溶解。

胶回收的目的是得到比较纯的目的基因的条带，以便可以更好地进行下一步实验。聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA***，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

（图片来源网络，侵删）

用binding buffer是为了增加洗脱柱对核酸的结合活性；wash solution是洗掉柱子里除核酸物质以外的杂质；而shuelution buffer就是最后把DNA从柱子上洗脱下来使用的溶液，一般是pH=0的TE，dd水也可以。

透析袋电泳法：与常规琼脂糖电泳原理相同，将含有目的基因片段的凝胶切下来，装入透析袋中，同时装入电泳缓冲液，再按常规电泳方法电泳，让DNA在透析袋内走出凝胶块，再纯化缓冲液中的DNA片段。

植物基因工程是指利用培养的植物组织、细胞或原生质体作为受体，通过某种途径或技术将来之于微生物、动物或植物的基因或人工合成的基因作为外源基因导入植物细胞并使之稳定地表达，实现植物遗传改良的生物工程。

（图片来源网络，侵删）

对于pGEM质粒，它的核心是GFP基因载体，可作为DNA探针的重要工具。实验流程包括质粒DNA的制备、胶回收和电泳检测，确保转化后的产物纯度。转化过程如下：取200微升感受态细胞悬液，加入不超过10微升的pGEM，42℃孵育后，加入LB培养基并摇匀，进行37℃培养。

【答案】B 【答案解析】试题分析：基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心。考点：考查基因工程的操作步骤。点评：难度中等，熟记基因工程的操作步骤。

【答案】：重组DNA的主要步骤主要包括以下4个基本步骤：（1）目的基因的获得；（2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；（3）将人工重组的DNA分子导入能进行正常***的寄主细胞，从而得到***：（4）重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。[考点]重组DNA的过程。

【答案】：基因工程又可称为DNA重组、分子克隆、基因操作等，是按照工程设计的方法，根据预先没计的蓝图，***用分子生物学、核酸生物化学以及微生物遗传学的现代方法和手段。实现DNA的人工重组。这种DNA重组主要是指创造自然界中没有的DNA分子的新组合。

基因工程是有目的地在体外进行的一系列基因操作。一个完整的基因工程实验包括5个步骤：（1）获取目的基因；（2）获取基因载体；（3）重组DNA；（4）把重组DNA导入受体细胞进行扩增；（5）筛选与培育。这一流程只是基因工程的基本轮廓，远远不能包含基因工程的全部内容。

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取。基因表达载体的构建。将目的基因导入受体细胞。目的基因的检测与表达。其中，构建基因表达载体是基因工程的核心步骤。解析：基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

基因工程的操作过程的主要步骤：切、接、转、增、筛（检）切：获得DNA片段，取得目的基因；载体的选择制备。

【答案】：基因工程的操作流程：（1）分：分离目的基因；（2）切：对目的基因和载体适当切割；（3）接：目的基因与载体连接；（4）转：重组DNA转入受体细胞；（5）筛：筛选出含有重组体的受体细胞；（6）表：目的基因在受体细胞中表达，受体细胞成长为基因改造生物。

基因工程一般包括四个步骤：一是取得符合人们要求的DNA（）片段，这种DNA（）片段被称为“目的基因”；二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组 DNA；三是把重组DNA引入某种细胞；四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。

关于基因工程操作实验，以及基因工程实验的操作程序及注意事项的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。