蛋白质沉淀()-蛋白质沉淀作用
本篇文章给大家分享蛋白质沉淀()，以及蛋白质沉淀作用对应的知识点，希望对各位有所帮助。
简述信息一览：
- 1、生物样品中蛋白质的处理方法有哪些?
- 2、蛋白质变性了一定沉淀吗
- 3、何谓蛋白质的变性与沉淀,二者在本质上有何区别
- 4、比较蛋白质的变性与蛋白质的沉淀,它们的异同点
- 5、请简述蛋白质变性与沉淀的关系
- 6、蛋白质变性沉淀和凝固之间的关系
生物样品中蛋白质的处理方法有哪些?
1、盐析法：盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
2、把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来，保持原来的天然状态，并不丢失生物活性。常用的方法：匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等。 超声波破碎法：当声波达到一定频率时，使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术。超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压，这个低气压使液体转化为气体，即形成很多小气泡。
3、盐析法：盐析法是一种常用的蛋白质分离方法，原理是向蛋白质溶液中加入高浓度的盐溶液，使蛋白质的溶解度降低，从而从溶液中析出。常用的盐析剂有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。盐析法操作简单，但需要控制好盐浓度和温度，否则可能会对蛋白质产生不可逆的变性。
4、常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等 离子交换色谱：蛋白质和氨基酸一样会两性解离，所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电，pH大于pI时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中，表面电荷情况不同。
5、一般这一步的分离用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大，既能除去大量杂质，又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大，又不适于用沉淀或盐析法浓缩，则可***用超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。
6、样品处理步骤与分析方法的选择—（一）去除蛋白质在测定血样时，首先应去除蛋白质。去除蛋白质可使结合型的药物均出来，以便测定药物的总浓度；去除蛋白质也可预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化的形成，以及可以保护仪器性能（如保护HPLC柱不被沾污），延长使用期限。去除蛋白法有以下几种。
蛋白质变性了一定沉淀吗
1、举例来说，当加入低强度盐时，破坏了蛋白质外水化膜，使得蛋白质沉淀，但蛋白质构象不变，因此是非变性的。变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和***结构有了改变或遭到破坏，这些都是变性的结果。
2、蛋白质变性后不一定会沉淀。蛋白质变性（protein denaturation）是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。变性原因：变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。
3、蛋白变性不一定就沉淀。只是空间结构的改变，基本的一级结构没有被破坏，一定条件下可以复性。只不过绝大多数条件都相当苛刻。蛋白沉淀不一定是蛋白质变性。盐析就是例子，盐析也可以让蛋白质沉淀，虽然脱去水化层，肽链未转变为伸展状，二级以上结构为变化。
何谓蛋白质的变性与沉淀,二者在本质上有何区别
1、也就是说，变性是以蛋白质的构象来定义的。而蛋白质的沉淀是说原来溶解在水中的蛋白，由于某种原因，溶解度下降，从溶液中沉淀出来。所以，沉淀是以溶解与否来定义的，二者是不同方面的概念。这两个概念虽然不同，但有很大相关性。我们说，结构决定功能。
2、性质不同 蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质的变性（denaturation），在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，称为蛋白质的变性。
3、具体地说，变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀，变性蛋白质只在等电点附近才沉淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固。例如，蛋白质被强酸、强碱变性后由于蛋白质颗粒带着大量电荷，故仍溶于强酸或强减之中。
4、变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素，即颗粒表面的水化层和电荷。若无外加条件不致互相凝集。然而除掉这两个稳定因素（如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂）蛋白质便容易凝集析出。
5、蛋白质变性是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。煮鸡蛋就是让蛋白质变性了 蛋白质的凝固通常是在发生变性作用以后产生的。
比较蛋白质的变性与蛋白质的沉淀,它们的异同点
1、两者都使蛋白质沉淀，但性质不一样，变性作用中蛋白质空间构象破坏，已失活；沉淀作用中蛋白质依然存有活性。两者中蛋白质一级结构都维持不变。
2、性质不同 蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质的变性（denaturation），在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，称为蛋白质的变性。
3、沉淀：蛋白质从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀。蛋白质变性后，疏水侧链暴露在外，肽链融汇相互缠绕继而聚集容易沉淀。凝固： 蛋白质经强酸、强碱作用发生变性后，仍能溶解于强酸或强碱溶液中，若将pH调至等电点，则变性蛋白质立即结成絮状的不溶解物，此絮状物仍可溶解于强酸和强碱中。
4、沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀，也可以是由于盐析。蛋白质变性是指光照，热，有机溶济以及一些变性剂（如重金属盐）的作用时蛋白质的空间结构被破坏，使得蛋白质丧失活性，该过程不可逆。
请简述蛋白质变性与沉淀的关系
【答案】：蛋白质沉淀和变性的概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影响下，蛋白质从溶液中析出的现象；而变性是指在变性因素的作用下蛋白质的空间结构被破坏，生物活性丧失，理化性质发生改变。
总之，变性的蛋白质容易沉淀，但沉淀的蛋白质不一定变性。
变性即为在外界条件的影响下，蛋白质的高级结构被破坏后，由活性状态变为失活状态的现象，蛋白变性后在适宜条件下可复性。能使蛋白变性的方法很多，如化学试剂变性，物理变性等，变性后的蛋白质由于溶解度下降，等电点的改变，就会开始团聚，最终形成沉淀，生鸡蛋煮熟后的状态就是典型的蛋白质变性。
【答案】：蛋白质的变性作用：蛋白质在某些物理或化学因素的影响下，其空间结构受到破坏，从而改变其理化性质，并失去其生物活性，称为蛋白质的变性。蛋白质的沉淀作用：由于水化层和双电层的存在，蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。
【答案】：在某些理化因素的作用下，蛋白质空间构象被破坏，致使其理化性质和生物学功能丧失，称作蛋白质变性。蛋白质变性后，其分子就从原来有序卷曲的紧密结构，变为无序的松散的伸展状结构，分子不对称性增加，疏水的侧链暴露在表面，造成其溶解度降低，易从溶液中析出沉淀。
蛋白质变性沉淀和凝固之间的关系
1、蛋白质变性是指天然蛋白质分子受到某些物理因素或化学因素的影响时，生物活性丧失、溶解度降低、不对称性增高以及其他理化性质发生改变的过程。蛋白质变性之后，一定会失去活性，但不一定会凝固、沉淀。因此A项、D项、E项错误。蛋白质沉淀后不一定变性，但凝固后一定会变性。因此C项错误，B项为正确答案。
2、沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀，也可以是由于盐析。蛋白质变性是指光照，热，有机溶济以及一些变性剂（如重金属盐）的作用时蛋白质的空间结构被破坏，使得蛋白质丧失活性，该过程不可逆。
3、蛋白质凝固后一定会变性，变性的蛋白质不一定会沉淀。蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。一般说，蛋白质约占人体全部质量的18%，最重要的还是其与生命现象有关。
4、凝固：蛋白质经强酸、强碱作用发生变性后，仍能溶解于强酸或强碱溶液中，若将pH调至等电点，则变性蛋白质立即结成絮状的不溶解物。拓展知识：蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。
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