蛋白质分光法-分光光度法测蛋白

简述信息一览：

紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法，不需要任何试剂，操作简单且易回收。

用紫外光吸收法测定蛋白质含量的依据是所有的蛋白质分子中都含有：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸三种氨基酸。因为这三种芳香族氨基酸含有苯环，具有共轭双键，可以吸收紫外线。

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以OD280为例，那是因为，组成蛋白质的氨基酸中有两种氨基酸苯丙氨酸和色氨酸带有苯环结构，在280nm有吸收峰；因此280nm的吸收值代表了这两种氨基酸的含量，再以此推断整个蛋白的含量（就像氨基酸的评价分子量是110一样。

实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。分光光度计法。取八支（或者更多）干净的10ml离心管，标记上号。取100ulBSA，加PBS4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量。以下引用：6种方法测定蛋白质含量微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。

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掌握蛋白分离纯化的步骤；掌握紫外吸收法定量测定蛋白质含量的原理和方法；了解紫外分光光度计的构造原理，掌握它的使用方法。

关于蛋白质分光法，以及分光光度法测蛋白的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。