在基因工程操作中_需要-进行基因工程实验时,常用的技术有

本篇文章给大家分享在基因工程操作中_需要，以及进行基因工程实验时,常用的技术有对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、基因工程实验中需要注意哪些方面的安全问题?求解
• 2、生物中基因工程中的DNA氢键断开是否需要DNA解旋酶?
• 3、基因工程技术流程中哪个环节需要用到聚合酶链式反应
• 4、...①在基因工程操作中为了获得重组质粒,必须用相同的限

基因工程实验中需要注意哪些方面的安全问题?求解

生态环境安全性问题：可能诱发食物链的破坏完整的食物链。也可能引发基因污染。对人体健康的威胁：免疫力问题，转基因生物及其产品有可能降低动物乃至人类的免疫能力，从而对动物及人类的健康安全甚至生存能力产生影响。

首先，害怕基因武器。用基因工程的办法研制各种新型的剧毒病原体已成现实。比如，把肉毒杆菌产生毒素的基因或致癌病毒基因引入大肠杆菌，大肠杆菌就变成***武器。肉毒毒素是一种异常毒的毒素，只要25克（半两）就足以把全世界的人毒死。第二，任何大肠杆菌经过基因重组，都可能成为有害的菌种。

一．基因工程可能引起广泛的生态环境安全性问题 1，可能诱发食物链的破坏完整的食物链是维系自然界万物共生、生态平衡极为重要的一环。一旦食物链遭到破坏，生态环境将会遭到致命威胁。转基因农作物作为一种新的人造品种进入原有的食物链，可能会导致食物链的改变甚至破坏。

在进行实质等同性评价时，一般要考虑以下主要方面：有毒物质：必须确保转入的外援基因或基因产物对人畜无害。过敏源：在自然条件下存在着许多过敏源，在基因工程中如果将控制过敏源形成的基因转入目标植物，则会对过敏源造成不利的影响。

转基因食品五大隐患 首先是毒性问题。一些研究学者认为，对于基因的人工提炼和添加，可能在达到某些人们想达到的效果的同时，也增加和积聚了食物中原有的微量毒素。其次是过敏反应问题。

生物中基因工程中的DNA氢键断开是否需要DNA解旋酶?

需要的，DNA解旋酶就是作用于氢键的。解旋酶是一类解开氢键的酶，而不是一种酶，由水解ATP供给能量来解开DNA的酶。它们常常依赖于单链的存在，并能识别***叉的单链结构。一般在DNA或RNA***过程中起到催化双链DNA或RNA解旋的作用。

需要，当然啦！不只一种，解旋酶在DNA不连续***过程中，结合于***叉前面，催化DNA双链结构解链，并具有ATP酶活性的酶。两种活性相互偶联，通过水解ATP提供解链的能量。不同来源的DNA解旋酶的共同特性是通过水解ATP提供解链的能量，而***叉结构的存在与否对活性的影响因酶而异。

DNA转录时氢键断裂不需要解旋酶，只需要RNA聚合酶就行了，因为RNA聚合酶就有解旋功能。

DNA***时，生物体内解开双链的氢键需要解旋酶，PCR中不需要，高温就可。2条单链的重新结合成新的DNA不需要酶的作用。

不需要解旋酶，是通过加热解旋的，当温度高于90度时，DNA就变性为单链。

转录过程中氢键使用双联DNA解开断裂。即配对的含N碱基间得H碱断裂，用到的是DNA解旋酶。

基因工程技术流程中哪个环节需要用到聚合酶链式反应

1、人工合成——化学合成；PCR（聚合酶链式反应）接：DNA片段和载体DNA在体外链接，形成重组子。转：将重组的DNA进入宿主细胞。

2、PCR（聚合酶链式反应）是在体外模拟DNA***的过程，基本步骤分为3大步：模板DNA的变性（94°左右）、模板DNA与引物的退火（复性，55°左右，具体根据引物退火温度而定）、引物的延伸（72°左右）。PCR的基本要素有：DNA模板、一对寡聚DNA引物、耐热DNA聚合酶、缓冲液、4种单核苷酸。

3、转基因技术的操作步骤主要包括基因克隆、基因导入、基因表达和基因检测等环节。基因克隆 基因克隆是转基因技术的第一步，它通过将目标基因从供体生物体中分离出来，得到目标基因的DNA序列。这一步通常使用PCR（聚合酶链式反应）技术，将目标基因扩增到足够多的数量。

4、其实，基因工程很多地方还是需要DNA聚合酶的，只不过DNA聚合酶不像限制性内切酶和连接酶那样在构建载体过程中反复用到。在克隆目的基因的时候，我们就会经常用到PCR（聚合酶链式反应）技术，里面就要用到耐热DNA聚合酶。

5、延伸（70～75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端一3′端延伸，合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。

...①在基因工程操作中为了获得重组质粒,必须用相同的限

1、目的基因和质粒要[同时]用同一种限制性核酸内切酶切割，不然就没法连了。但最好用不同的限制酶切两端（切目的基因是不是应该切两下么），防止载体自连或目的基因自连。啊啊，这道题。

2、用同种限制酶说明质粒里面也有和目的基因一样的基因这样说是不正确的。限制酶识别的是碱基对序列的顺序而不是“基因种类”。用同样的限制酶处理目的基因和质粒是为了产生相同的粘性末端，以便可以将两者连接起来（原理是：碱基对互补配对）。

3、其实用同一种限制酶（单酶切）分别切割目的基因与运载体是最简单的一种方法，因为切割后能产生相同的粘性末端，末端之间能发生碱基互补配对而形成重组DNA分子，操作简单，但连接后会出现两种不需要的连接方式：目的基因——目的基因（环状）、质粒——质粒（环状），这样就加大了筛选工作量。

4、不一样，因为只是切口处相同而已，内容不一样。但这种方法成功率低以为会出现很多种不成功的组合，要通过一系列的筛选才能的到想要的质粒（通常是一起放入细胞，在用抗生素进行选择性培养）。

5、好吧 之前弄错了 一般情况下，要把目的基因连接，需要用同一种或同两种限制性内切酶酶切质粒和目的基因。在本题中，酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分，如果质粒用酶II处理，那么在geneI和II区都会被切断，质粒变成了两段线性序列。所以质粒只能由酶I酶切。

6、不一样。 若目的基因来自甲，要将其转入乙体内，则用某种限制酶将甲的目的基因切下，用同种酶切开质粒，由于同种酶切开的切口相同，目的基因就整合进了这个质粒里，而质粒原本是没有这个目的基因的。

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