基因工程目的基因的检测方法-基因工程实验目的

接下来为大家讲解基因工程目的基因的检测方法，以及基因工程实验目的涉及的相关信息，愿对你有所帮助。

简述信息一览：

• 1、基因工程中目的基因的检测问题.
• 2、如何对目的基因进行检测与鉴定
• 3、有关基因工程中目的基因的检测的问题。
• 4、怎么对受体细胞中的目的基因进行检测与鉴定?
• 5、利用基因工程技术进行药物的研制与开发时,目的基因的鉴定方法有哪些?其...
• 6、检测目的基因是不是只有酶切鉴定、PCR后电泳、测序这三种方法?

基因工程中目的基因的检测问题.

第一个问题：生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。

检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验，来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。

利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选。此法不是直接筛选目的基因，而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞，因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。

检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

从转基因生物种取出含有目的基因片段的双链DNA，然后加热使之变性成两条单链。再用DNA探针与这两条单链分别杂交（即复性，产生双链）。所谓的探针就是含有目的基因的同位素标记过的DNA片段。当目的基因成功导入我们要测的基因上时，探针就可以与之进行碱基配对。

检测受体细胞中的标记基因是否表达，即是否表现出标记基因的性状，从而判断受体细胞中是否已导入含有目的基因的运载体。如果检测出标记基因表达的性状，说明运载体已导入受体细胞。检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。

如何对目的基因进行检测与鉴定

1、- 使用DNA分子杂交技术确认目的基因是否已导入受体细胞；- 通过分子杂交技术检测目的基因是否已转录形成RNA；- 利用抗原-抗体杂交技术确定目的基因是否已翻译成蛋白质；- 在生物个体水平进行鉴定，例如通过抗虫试验验证转基因植物的抗虫性。

2、对目的基因进行鉴定：1直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对；2 mRNA测定：根据目的基因组得出其转录的mRNA组成，利用探针检测；3蛋白测定：可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白，也可***用 免疫化学 法导入蛋白 抗体 检测蛋白。

3、②、表达检测：检测目的基因是否完成转录出mRNA。分子杂交法检测RNA。检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

4、可以从三方面对目的基因进行鉴定：1直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对；2 mRNA测定：根据目的基因组得出其转录的mRNA组成，利用探针检测；3蛋白测定：可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白，也可***用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

5、Sanger测序这种直接测序方法具有高度的准确性和简单、快捷等特点。目前，依然对于一些临床上小样本遗传疾病基因的鉴定具有很高的实用价值。例如，临床上***用Sanger直接测序FGFR2基因证实单基因Apert综合征和直接测序TCOF1基因可以检出多达90%的与TreacherCollins综合征相关的突变。

有关基因工程中目的基因的检测的问题。

检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验，来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。

第一个问题：生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。

利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选。此法不是直接筛选目的基因，而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞，因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。

检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

目的基因导入受体，说起来简单。但实际的过程并不是我们宏观上放取物品那么简单。先把整个过程考虑完你再考虑你的方案是否成立。引入放射性同位素，以后的所有过程都涉及安全问题 教科书的方案很原始，而且转基因检测的通常不是DNA，而是其表达的蛋白，用的是western。

检测受体细胞中的标记基因是否表达，即是否表现出标记基因的性状，从而判断受体细胞中是否已导入含有目的基因的运载体。如果检测出标记基因表达的性状，说明运载体已导入受体细胞。检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。

怎么对受体细胞中的目的基因进行检测与鉴定?

1、DNA分子杂交法（DNA探针法）。②、表达检测：检测目的基因是否完成转录出mRNA。分子杂交法检测RNA。检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

2、方法是：用同位素标记的目的基因的单链做探针与可能插入目的基因的染色体dna杂交，洗去未结合的探针，结合的不被洗去。

3、目的基因的检测是看看目的基因进入受体细胞没，所以先利用基因探针检查受体细胞中是否含有目的基因；其次需要考虑，受体细胞中有了目的基因后是否能顺利转录，因此还是基因探针来检查信使RNA；含有信使RNA后还得考虑是否能翻译形成蛋白质，利用抗原-抗体杂交来检测蛋白质。

4、检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验，来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。

5、目的基因的检测是检测标记基因，而其鉴定是观测目的基因所表达出来的性状。所谓检测，就是看目的基因是否已经成功导入受体细胞，要看的是标记基因。导入细胞后，基因并不一定会遗传给后代并表达出来，所以要再鉴定目的基因的性状。注意！一定是先检测，后鉴定。

利用基因工程技术进行药物的研制与开发时,目的基因的鉴定方法有哪些?其...

1、第三代：单分子/纳米孔测序。主要解决高通量测序存在的读长短和耗时长的问题，但目前技术尚未完全成熟。

2、②、表达检测：检测目的基因是否完成转录出mRNA。分子杂交法检测RNA。检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

3、所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。

4、基因工程第四步中包括导入检测，转录检测和翻译检测，方法分别是DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。

5、氨基酸序列合成法 这种方法是建立在DNA序列分析基础上的。当把一个基因的核苷酸序列搞清楚后，可以按图纸先合成一个个含少量（10～15个）核苷酸的DNA片段，再利用碱基对互补的关系使它们形成双链片段，然后用连接酶把双链片段逐个按顺序连接起来，使双链逐渐加长，最后得到一个完整的基因。

6、因此，在基因工程中，cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。这种方法有如用***发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来。

检测目的基因是不是只有酶切鉴定、PCR后电泳、测序这三种方法?

1、就能分析得结果；如插入的目的序列中有其它限制性内切酶位点，也能在酶切电泳图谱上观察到。这就可以进一步鉴定重组体是不是所要的目的克隆。核苷酸序列测定 所得到的目的序列或基因的克隆，都要用其核酸序列测定来最后鉴定。

2、每一次DNA测序是由4个独立的反应组成，将模板、引物和4种含有不同的放射性同位素标记的核苷酸的ddNTP分别与DNA聚合酶混合形成长短不一的片段，大量起始点相同、终止点不同的DNA片段存在于反应体系中，具有单个碱基差别的DNA序列可以被聚丙烯酰胺变性凝胶电泳分离出来，得到放射性同位素自显影条带。

3、目的基因片段的获取：目的基因的组成：一个能转录翻译的结构基因应包括转录启动区、核糖体识别区、编码区、和转录终止区。

关于基因工程目的基因的检测方法，以及基因工程实验目的的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。