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基因工程荧光蛋白基因-基因工程荧光植物

文章阐述了关于基因工程荧光蛋白基因,以及基因工程荧光植物的信息,欢迎批评指正。

简述信息一览:

luc标记的必须是活细胞吗

萤火虫荧光素酶以其高灵敏度和宽广的检测范围,成为哺乳细胞研究中的首选,只需借助荧光比色计,就能高效进行高通量筛选。通过改良的萤火虫荧光素酶,无需裂解细胞,也能实时监测酶活性,Renilla荧光素酶则因其膜透性和光裂解特性,成为活细胞研究的理想选择。

萤光素酶(Luciferase,Luc)常作为“报告蛋白”被用于分子生物学研究中,常见的有萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶和Guassia荧光素酶,他们可以催化荧光素底物发射荧光,作为示踪标签常用于活体成像、药物分析等领域。

基因工程荧光蛋白基因-基因工程荧光植物
(图片来源网络,侵删)

靶细胞用其标记后与效应细胞共充,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试剂,它对细胞无毒,不能进入活细胞但可能进入膜已破损的死细胞),淬灭培养液中的荧光,在板式荧光扫描仪上定量测定活细胞内的荧光强度,与靶细胞对照孔(代表细胞100%存活)比较。

本法简单易行,与51Cr释放法同样敏感可信,重复性和相关性很好,另一优点是可用新制备的脾细胞作靶细胞,不再需要培养及活化靶细胞,还可测多种动物的NK活性。

②51Cr自发释放率高,常因不同靶细胞标记效率变化差别大而影响结果判定;③51Cr半衰期(28天),无法用于需多次测定的动物试验;④细胞共育时间短而试验操作步骤多,不能在单个细胞水平进行测定。

基因工程荧光蛋白基因-基因工程荧光植物
(图片来源网络,侵删)

荧光蛋白技术的优点

1、优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。

2、来自莫斯科的研究人员培育出一种深红色的荧光蛋白质,这种蛋白质发出的光穿透性极强,即使蛋白质位于小动物体内深处,其发出的光也可以穿透生物体被外界看到,这使生物学家能够更方便地监视活生物体的发病和康复过程,而不用侵入式地进行研究。这一最新研究成果公布在《Nature Methods》在线版上。

3、荧光蛋白在某种定义下可以说是革新了生物学研究——运用荧光蛋白可以观测到细胞的活动,可以标记表达蛋白,可以进行深入的蛋白质组学实验等等。特别是在癌症研究的过程中,由于荧光蛋白的出现使得科学家们能够观测到肿瘤细胞的具体活动,比如肿瘤细胞的成长、入侵、转移和新生。

在基因工程中,标记基因是怎么标记的?同位素标记法?

1、标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。

2、楼主你对标记基因本身理解就有错误啊,标记基因本身作用就是标记,而不是要在它的里面做标记。所谓标记基因,经常是用于检测转基因时基因是否正确插入目标物种中并且顺利表达了。在基因工程中,狭义上,标记基因是指能够表现出特殊表型的基因,这些基因能够使目的基因插入和表达可视化。

3、额,标记基因的用途首先要弄懂,一般是带有抗生素抗性的,或者是可以通过染色等手段能检测到其产物的一些基因序列;目的,为了方便在构建载体时阳性的筛选以及体外扩增、转化。

4、标记基因是用在基因工程中,用在重组质粒上,选用的质粒本身应具备特殊的标机基因如四环素抗性基因等,若没有的话需导入。作用是供重组DNA的鉴定和选择。

5、标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。(在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。)所以标记基因不是被标记了的基因,是用来标记DNA的基因。

绿色荧光蛋白基因在基因工程中是不是标记基因

1、标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。

2、标记基因是帮助对转基因生物工程体进行筛选和鉴定的一类外源基因,包括选择标记基因和报告基因。在选择压下,不含标记基因及其产物的非转化细胞和组织死亡,转化细胞由于有抗性而可以继续存活。

3、在基因工程中,狭义上,标记基因是指能够表现出特殊表型的基因,这些基因能够使目的基因插入和表达可视化。比如GFP(绿色荧光蛋白)或者GUS报告基因,在操作中,可以将这些基因和目的基因进行融合表达,那么如果目的基因表达了,那么就能通过这些报告基因的表型来检测基因是否表达和表达量的多少。

关于基因工程荧光蛋白基因,以及基因工程荧光植物的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。

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